作为一种广泛使用的胰岛β细胞系,正以其独特的优势成为糖尿病机制研究、药物筛选及治疗开发的重要工具。今天,让我们一起揭开MIN6细胞培养的神秘面纱。
一、胰岛β细胞的理想替代
MIN6细胞是从转基因小鼠胰岛瘤中分离得到的一种永生化细胞系,保留了胰岛β细胞的许多关键特性,包括:
胰岛素分泌功能:MIN6细胞能够响应葡萄糖刺激,分泌胰岛素,是研究胰岛素分泌机制的理想模型。
稳定性:作为一种永生化细胞系,MIN6细胞可以在体外长期培养,避免了原代胰岛细胞寿命有限的问题。
易操作性:MIN6细胞易于传代和冻存,适合大规模实验和高通量筛选。
二、MIN6细胞的培养
培养基:DMEM (中乔新舟 货号:ZQ-100)+10%FBS(中乔新舟 货号:ZQ0500)+1%P/S(中乔新舟 货号:CSP006)。
细胞特性:MIN-6细胞不规则、无细胞形态,贴壁性差,细胞成片状形成小岛屿,密度高后岛屿连接形成大片,该细胞汇合度达不到100%密度。
传代频率: T25瓶80%汇合度,1:2传代需要3-5天再次进行传代。
换液频率:2-3次/周(T25瓶7ml完全培养基)。
(中乔新舟MIN-6细胞培养图 10X)
三、Min6培养注意的细节:
培养:细胞贴壁性不好,培养过程中会有漂浮的圆形细胞,属于正常现象。
传代:在消化过程中,当细胞成片脱落后,建议再室温延长消化2min,让团块分散开一些。
运输: 由于MIN-6细胞形态无规则性,贴壁性差,发货T25瓶到货后会出现一些不可控因素,可能会脱落,皱缩漂浮,如下到货细胞状态,应该怎么处理呢?下面由小编给大家汇总一下吧。
(我司客户到货T25复苏瓶MIN-6细胞图)
到货T25细胞处理步骤:
1. 到货发现有任何异常现象,污染、漏液、细胞漂浮等,请拍10X、 20X 各 2-3 张照片,并当天联系我司销售人员/区域代理或者我司技术人员。
2. 用 75%酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,满瓶培养基状态置于培养箱中静置培养2~4h 后进行操作。
3. 2-4小时后观察贴壁情况,若部分漂浮,需收集悬液,1200rpm/5min(约 250g 离心力)离心,收集漂浮细胞。
4. 瓶内贴壁细胞消化步骤:
培养基去除干净,用PBS轻轻洗涤细胞。(T25瓶3-5ML)
加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37℃消化3-5分钟。手掌心拍打瓶尾部,显微镜下观察,细胞消化成流沙状成单个细胞脱落。
加入3-5ml完全培养基终止消化,轻轻吹打细胞至单细胞悬液,合并悬浮细胞。
按1:2的比例将细胞接种至新的培养瓶中。
5. 消化1:2传代后第二天细胞状态图:
(MIN-6细胞1:2传第二天,图片由中乔客户提供)
6. 培养3天后细胞状态图,此时可再次进行传代分瓶。
(中乔新舟客户提供,手机拍摄)
7.若培养过程中或实验铺板漂浮细胞多,可用多聚赖氨酸处理细胞培养瓶或孔板,让细胞贴壁更牢固。
四、选择MIN6细胞,开启糖尿病研究的新篇章!
如果您在培养MIN6细胞方面有任何问题,欢迎随时联系我们!我们将为您提供专业的技术支持和优质的产品服务,助您在糖尿病研究的道路上走得更远!
MIN-6胰岛β细胞的理想替代!
作者:上海中乔新舟生物科技有限公司 2025-03-10T00:00 (访问量:545)
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