做细胞实验的各位,
有没有曾经哪一天,
当您开心把即将养好的细胞拿出来
准备做后续实验时,
发现居然细菌污染了???
(想想都是泪…)
对当时的我们来说,
这些细菌就是 罪犯!!!
一群“十恶不赦”的 罪犯!!!
然而,
市面上有各种“打击罪犯”的抗生素武器
能尝试挽救我们的细胞,
但我们了解这些武器的作用方式吗?
接下来就让BI小课堂
带您了解这些“抗生素武器”吧!
抗生素
- 细菌就像是一群 “能自制毒药的罪犯”
- 抗生素就是能“抑制罪犯生长或杀死罪犯的武器”
最早的抗生素-青霉素(Penicillin)是微生物学家弗莱明于自然界中发现的一种抗菌物质;至今,许多专家以合成或半合成的方式发明了更多种类的抗生素,用来对抗各种不同的细菌。
打击罪犯方法-抗菌法
抗生素武器可依其“打击罪犯的方法”(也就是抗菌方法)简单分成五大类(下图1):
1. 抑制微生物细胞壁合成- 破坏罪犯的防弹衣
阻碍细菌细胞壁的合成,导致细菌在低渗透压环境下溶胀破裂死亡,而哺乳动物细胞没有细胞壁,不易受这类药物的影响,所以此类抗生素普遍细胞毒性较小。
- β-内酰胺类抗生素(Beta-lactam Antibiotic, 含青黴素Penicillin、头孢菌素Cephalosporin等)大多为此原理。
2. 破坏细胞膜功能- 扒掉罪犯的衣服
与细菌细胞膜相互作用,增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道,让细菌内部有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。
- 多粘菌素Polymyxin、达托霉素Daptomycin等为此类抗生素。
3. 抑制遗传物质的复制及转录- 销毁罪犯的制毒图纸
阻碍DNA复制,抑制细菌分裂繁殖;或阻碍DNA转录mRNA,使后续mRNA翻译蛋白的过程受阻。
- 喹诺酮类Quinolones、利福平Rifampin等为此类抗生素。
4. 抑制蛋白质合成– 销毁制毒所需材料
与细菌核糖体或tRNA相互所用,抑制细胞存活所需的结构蛋白和酶等蛋白质合成进而杀死或抑制细菌生长。
- 链霉素Streptomycin、新霉素Neomycin、庆大霉素Gentamicin、卡那霉素Kanamycin等为此类抗生素。
5. 影响微生物代谢功能- 截断罪犯营养能量来源
细菌生长过程必须利用叶酸做养料,此类药物阻断细菌叶酸合成,进一步使细菌因叶酸不足而死亡。
- 甲氧苄啶Trimethoprim、磺酰胺Sulfonamides等为此类抗生素。
▲图1:常见抗生素抗菌方法示意图。
控制罪犯的能力-抑菌/杀菌力
而这些抗生素武器又可依“控制罪犯的能力”(是否直接杀死细菌)再分成两种:
- 抑菌型(bacteriostatic)抗生素:无法直接杀死微生物,但能控制微生物增长速度,大多为抑制细胞壁或蛋白质合成的抗生素。
- 杀菌型(bactericidal)抗生素:可直接破坏微生物本身,大多以破坏细胞膜结构、阻碍遗传物质复制或影响代谢功能而导致菌体死亡。
纯抑菌型抗生素大多用于临床治疗,抑制病患体内细菌的生长速度,等待病患的免疫系统清除已存在的菌体,然而,体外细胞培养并没有免疫系统能帮助我们杀死菌体,所以大多使用杀菌型抗生素来尝试清除细菌;但多种抗生素在低浓度的状况下为抑菌型,在高浓度状况下则有杀菌效果(转为杀菌型,如青黴素),因此实验中“预防性使用”或“补救性使用”上会有浓度的调整,所以各位在使用购入的抗生素前,请详阅产品说明书噢。
说了这么多!
直接告诉我怎么救我的细胞啊!
(这里先不讨论细菌污染以外的处里方法)
- 步骤 1
先确定是细菌?真菌?还是无法判断?并赶快把污染的细胞跟正常的细胞隔离!
- 步骤 2
根据状况做以下抉择...
A. 丢弃污染细胞,并重新复苏细胞(复苏过程如果不放心,可搭配合适的抗生素使用做预防)。
B. 或使用合适的抗生素来挽救细胞。

▲表1:BI抗生素产品列表
最后,有个重要的观念提醒!
不侥幸的态度
及
良好的无菌操作技巧
才是做好细胞实验的
重要基础噢!